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4 razones para la contaminación durante los experimentos de PCR

Jan 26, 2022 Dejar un mensaje

Debido al brote del nuevo coronavirus, la construcción de laboratorios de amplificación de genes por PCR en varios lugares se ha acelerado gradualmente. La detección de ácido nucleico viral es un estándar importante para el diagnóstico de neumonía coronaria nueva. El laboratorio de PCR, también conocido como laboratorio de amplificación de genes, adopta tecnología de biología molecular. Al amplificar fragmentos de ácido nucleico, también se puede considerar como una replicación especial de ácido nucleico in vitro. El sistema de seguimiento de genes se utiliza para captar el contenido del virus en el cuerpo humano, y la precisión de detección puede alcanzar el nivel nanométrico. La detección de ácido nucleico de coronavirus nuevo también pertenece a esta categoría de tecnología y es un estándar importante para el diagnóstico de neumonía coronaria nueva.

El laboratorio de amplificación de genes por PCR amplifica principalmente la plantilla de ácido nucleico de detección. Se puede ver que la contaminación cruzada es más probable que ocurra en el laboratorio, lo que da como resultado resultados falsos positivos en las muestras de prueba. Por lo tanto, los laboratorios de PCR tienen estrictos requisitos y estándares de diseño.

Ahora, la tecnología PCR ha sido ampliamente utilizada en los campos de enfermedades infecciosas, detección de tumores, genética reproductiva, etc. Sin embargo, debido a la amplificación múltiple y grande del ácido nucleico que se analizará con esta tecnología, incluso una cantidad muy pequeña de contaminación puede conducir fácilmente a la segunda PCR Los requisitos técnicos son relativamente altos y el proceso experimental es complicado. Si hay omisiones en los enlaces intermedios, se pueden producir falsos negativos.

1. Es la contaminación de los productos de amplificación por PCR. También es la causa más común de contaminación. Después de la amplificación repetida de los productos de la PCR, la cantidad de replicación supera con creces el límite de detección de la PCR, por lo que incluso una cantidad muy pequeña de contaminación es suficiente para causar falsos positivos en los resultados experimentales.

2. Contaminación del reactivo. Durante la preparación de reactivos, el contacto con recipientes, pipetas, puntas de pipeta, soluciones, etc. contaminados puede provocar la contaminación de los reactivos.

3. La muestra a analizar está contaminada. El recipiente en el que se coloca la muestra está contaminado o la muestra está contaminada debido al mal sellado del recipiente; en segundo lugar, el uso de pipetas o puntas de pipeta contaminadas durante el proceso de extracción de ácido nucleico conducirá a la contaminación de la muestra; además, algunas muestras contienen virus. Si se difunden en el aire, puede ocurrir una contaminación cruzada.

4. Contaminación por aerosoles. Si el aerosol contiene virus y otros contaminantes y se esparce por el aire, es muy probable que provoque la contaminación del producto PCR. Los aerosoles se crean por la fricción entre el aire y la superficie de un líquido. Abrir la tapa, agitar el tubo de reacción y aspirar repetidamente el muestreador de contaminación puede formar aerosoles que pueden provocar contaminación cruzada. Después del cálculo, una partícula de aerosol puede contener 48,000 partes, por lo que se debe prestar especial atención a la contaminación causada por el aerosol. Mientras el laboratorio de PCR esté contaminado, el informe de resultados anterior no es válido y no se pueden realizar otras operaciones experimentales. La fuente de contaminación debe identificarse y eliminarse completamente para obtener resultados experimentales precisos y efectivos.